Применение проточной цитометрии
09/18/2021
| Самое простое приложение проточной цитометрии – подсчет клеток и оценка их жизнеспособности. Для этого используются классические красители на жизнеспособность, например, наборы LIVE/DEAD kit или Muse® Count and Viability Kit. Набор состоит из одного или нескольких красителей, которые позволяют отличить мертвые клетки или клетки с нарушенной целостностью клеточной мембраны от живых клеток. |  | |||||||||
| Проточную цитометрию можно использовать для анализа клеточного цикла. Различные стадии клеточного цикла отличаются по содержанию ДНК в клетке. Наборы для анализа клеточного цикла содержат ДНК-связывающие красители, интенсивность флуоресценции которых пропорциональна количеству ДНК. С помощью гистограммы интенсивности флуоресценции можно выделить клетки в G0/G1, S и G2/M фазах клеточного цикла. |  | |||||||||
| Анализ апоптоза основан на связывании Аннексина V с фосфотидилсерином на поверхности апоптотирующих клеток. На ранних стадиях апоптоза молекулы фосфотидилсерина перемещаются на внешнюю сторону клеточной мембраны и способны связываться с Аннексином V. На поздних стадиях апоптоза клетки теряют целостность клеточной мембраны и поглощают краситель, который иначе не смог бы проникнуть через клеточную мембрану. | ||||||||||
 | ||||||||||
| Для анализа различных стадий апоптоза проводят определение активированных каспаз в сочетании с красителем, окрашивающим мертвые клетки. Проточная цитометрия в иммунологии активно используется для иммунофенотипирования клеток крови, позволяет идентифицировать внутриклеточные белки, оценить степень цитотоксичности, и многое другое. | ||||||||||
 Субпопуляции Т-клеток периферической крови и поверхностные антигены, применяемые для их выявления * только для научных исследований, не для клинической диагностики | ||||||||||
| Проточная цитометрия в клинической лабораторной диагностике Достаточно быстро проточная цитометрия стала рутинным методом в диагностических лабораториях клиник. На сегодняшний день проточные цитометры, зарегистрированные Росздравнадзором, в лабораторной диагностике активно используют для оценки иммунного статуса пациента (для этого используют такие поверхностные маркеры, как CD3, CD4, CD8, CD 19, CD 20, CD22 и т.д.), оценку иммунологического фенотипа нормальных и опухолевых клеток для своевременной постановки диагноза, а также отслеживание острых лейкозов в ходе лечения. Большой вклад проточная цитометрия внесла в диагностику гемобластозов.
| ||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Примечания: CY – цианин; * – тандемные флуоресцентные красители | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Почему проточной цитометрии – быть Сравнивая с молекулярными методами диагностики, главные преимущества проточной цитометрии — это возможность быстрой оценки большого количества параметров при относительной экономичности исследования. С другой стороны, многообразие реагентов и технологических решений (от самых простых клеточных анализаторов до проточных цитометров и цитометров с визуализацией) позволили значительно расширить как прикладные, так и диагностические возможности проточной цитометрии, делая ее одним из мощнейших методов клеточного анализа. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
© 2020 - 2024 Научно-Исследовательская Аналитическая Платформа LAB-TEST. На базе Multi-Vendor - Платформа для интернет-магазинов