ГОСТ 7636-85 Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа

Окраска раствора устойчива и сохраняется в течение нескольких часов.

5.7.6.        Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 500 см³ последовательно вносят из бюретки основной стандартный раствор сорбиновой кислоты в количествах, указанных в табл. 5.

В каждую колбу приливают по 10 см³ раствора трихлоруксусной кислоты 200 г/дм³, разбавляют содержимое дистиллированной водой до ¹/₂ объема колбы и проводят все дальнейшие операции в соответствии с п. 5.7.5.

Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют спектрофотометром или фотоэлектроко- лориметром при длине волны 532 нм.

Подготовку серии растворов для построения градуировочного графика проводят три раза, начи- ная каждый раз с приготовления основного раствора сорбиновой кислоты. Для каждого раствора одинаковой концентрации берут среднее значение оптической плотности трех измерений.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс количе- ство сорбиновой кислоты, на оси ординат — соответствующие оптические плотности.

5.7.7.           Обработка результатов

Массовую долю сорбиновой кислоты в продукте (Х₂₂) в процентах вычисляют по формуле

ту 100

^^{22 =} тп- 1000 ’

где m — масса икры, взятая для приготовления вытяжки, г;

т_{ — содержание сорбиновой кислоты, найденное по градуировочному графику, мг;

1000 — коэффициент пересчета миллиграммов в граммы.

За окончательньгй результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,02 %.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

5.9.1.           Сущность метода

Метод основан на термохимической минерализации (сжигание, обработка соляной кислотой) навески икры и весовом определении песка.

5.9.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919—83.

Баня водяная.

Шкаф сушильный.

Электропечь сопротивления лабораторная.

Эксикатор по ГОСТ 25336—82.

Ступка фарфоровая по ГОСТ 9147—80.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147—80.

Тигель фарфоровый по ГОСТ 9147—80.

Колба коническая по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250 см³.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336—82.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76.

Фильтр обеззоленный.

Кислота соляная по ГОСТ 3118—77, раствор 100 г/дм³ (10 %-ньгй).

5.9.3.           Проведение анализа

20—50 г измельченной икры, взвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, подсу- шивают в фарфоровой чашке или большом тигле в сушильном шкафу, затем обугливают на плитке или в муфельной печи. Уголь выщелачивают горячей водой и фильтруют. Фильтр с осадком озоля- ют. Золу обрабатывают раствором соляной кислоты 100 г/дм³ в течение 30 мин на кипящей водяной бане и фильтруют через обеззоленный фильтр. Осадок на фильтре промывают горячей водой до исчезновения реакции на хлор (проба с раствором азотнокислого серебра). Фильтр вместе с осадком сжигают и прокаливают в предварительно взвешенном фарфоровом тигле. Тигель охлаждают в эк- сикаторе и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

5.9.4.           Обработка результатов

Массовую долю песка (Х₂₂) в процентах вычисляют по формуле

_ (т₂ - mQ ■ 100

где т — масса икры, г; т_Л — масса тигля, г;

т₂ — масса тигля с прокаленным осадком, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

6.          МЕТОДЫ АНАЛИЗА КОНЦЕНТРАТОВ, БЕЛКОВОЙ МАССЫ, БУЛЬОНОВ, ГИДРОЛИЗАТОВ И ПАСТ

Для жидких продуктов навеску массой 3—5 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, предварительно высушенную с песком до постоянной массы, переносят в фарфоровую ступку и растирают до получения тонкого порошка, который количественно переносят в пакет для дальней- шей экстракции эфиром.

Пересчет на белковые вещества не проводят.

6.5.1.1.            Сущность метода

Метод основан на осаждении белка фосфатом меди и титриметрическом определении аминного азота в фильтрате.

6.5.1.2.            Аппаратура, реактивы и материалы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Колбы мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 50, 100, 1000 см³.

Пипетки градуированные по ГОСТ 29227—91, вместимостью 2, 5, 10, 20 см³.

Бюретка по ГОСТ 29251—91, вместимостью 50 см³.

Воронки по ГОСТ 25336—82.

Колбы конические по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 см³.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 50 и 250 см³.

Капельница лабораторная по ГОСТ 25336—82.

Фильтры бумажные с синей лентой.

Кислота соляная, х. ч., по ГОСТ 3118—77, плотностью 1119 кг/м³.

Кислота уксусная, х. ч., по ГОСТ 61—75 ледяная.

Потенциометр постоянного тока по ГОСТ 9245—79.

Калий йодистый, х. ч., по ГОСТ 4232—74, раствор 100 г/дм³ (10 %-ный).

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163—76, раствор 10 г/дм³ (1 %-ный).

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), раствор 0,01 моль/дм³ (0,01 н).

Натрий тетраборнокислый (бура), х. ч., по ГОСТ 4199—76.

Натрия гидроксид, ч. д. а., по ГОСТ 4328—77, раствор 0,5 моль/дм³ (0,5 н).

Натрий фосфорнокислый трехзамещенный, ч. д. а., по ГОСТ 201—76.

Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный по ГОСТ 4172—76.

Медь двухлористая 2-водная, ч. д. а., по ГОСТ 4167—74.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

Тимолфталеин, раствор 2,5 г/дм³ (0,25 %-ный) в 50 %-ном этиловом спирте.

6.5.1.3.            Приготовление растворов

Раствор хлорной меди

27,3 г хлорной меди растворяют в 500 см³ дистиллированной воды, перемешивают и доводят объем до 1000 см³ дистиллированной водой.

Раствор фосфата натрия

68,5 г трехзамещенного фосфорнокислого натрия растворяют в 500 см³ дистиллированной воды, перемешивают и доводят объем до 1000 см³ или 64,5 г двузамещенного 12-водного фосфорнокислого натрия растворяют в 500 см³ дистиллированной воды, освобожденной кипячением от углекислого газа, добавляют 7,2 г гидроксида натрия и доводят объем до 1000 см³ дистиллированной водой.

Боратный буферный раствор

28,6 г тетрабората натрия растворяют в 750 см³ дистиллированной воды, добавляют 50 см³ раствора соляной кислоты 1 моль/дм³ (1 и) и доводят объем дистиллированной водой до 1000 см³ (pH 8,8).

Суспензия фосфата меди

Смешивают один объем раствора хлорида меди с двумя объемами раствора фосфата натрия и приливают два объема боратного буфера.

Суспензия готовится перед началом работы.

6.5.1.4.           Проведение анализа

В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают 0,2—0,3 г упаренного или 0,10—0,15 г сухого гидролизата, отвешенного с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, добавляют 4 см³ воды, 5 капель тимолфталеина и по каплям раствор 0,5 моль/дм³ гидроокиси натрия до слабо-голубого окрашивания (pH 10,2). После этого в колбу добавляют 20 см³ суспензии фосфата меди, хорошо перемешивают. При исчезновении осадка добавляют еще 5 см³ суспензии, объем в колбе доводят до метки дистиллированной водой, энергично перемешивают и фильтруют через плотный фильтр. Фильтрат должен быть абсолютно прозрачным.

В две колбы отмеряют по 10 см³ фильтрата, подкисляют 0,4 см³ ледяной уксусной кислоты, добавляют 7,5 см³ раствора йодида калия 100 г/дм³ и титруют выделившийся йод раствором 0,01 моль/дм³ тиосульфата натрия. В процессе титрования, когда раствор примет соломенно-жел- тую окраску, добавляют 1,5 см³ крахмала (появляется синяя окраска) и продолжают титрование до исчезновения синей окраски.

Одновременно проводят контрольное определение без исследуемого раствора.

6.5.1.5.           Обработка результатов

Массовую долю аминного азота (Х₂₄) в процентах вычисляют по формуле

(V - Kj) ■ 0,28 К ■ V₂ ■ 100 ^²⁴ “                              V₃ ■ т - 1000                     ’

где V —объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм³, израсходованный на титрование иссле- дуемого образца, см³;

Fj —объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм³, израсходованный на титрование контрольного образца, см³;

К — коэффициент пересчета на точный раствор 0,01 моль/дм³ тиосульфата натрия;

V₂ — объем приготовленного раствора, см³;

V,, — объем фильтрата, взятый на титрование, см³;

0,28 —количество аминного азота, соответствующее 1 см³ точного раствора 0,01 моль/дм³ тио- сульфата натрия, мг; т — масса исследуемого образца, г.

1000 — коэффициент пересчета мг в г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождения между которыми не должны превышать 0,2 %.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

6.5.2. Определение аминного азота формольным титро- ванием

6.5.2.1.           Сущность метода

Метод основан на связывании аминных групп с формалином и косвенном определении их количества по результатам титрования карбоксильных групп.

6.5.2.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104-88. Потенциометр постоянного тока измерительный с пределами измерений значений pH от 0 до 14 по ГОСТ 9245-79.

Стаканы стеклянные лабораторные по ГОСТ 25336—82, вместимостью 50, 100 см³.

Пипетки по ГОСТ 29227—91, вместимостью 2, 20 см³.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770—74, вместимостью 10 см³.

Колба мерная по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³.

Бюретка по ГОСТ 29257—91, вместимостью 25 см³.

Мешалка магнитная.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, раствор 0,1 моль/дм³ (0,1 и) и 0,02 моль/дм³ (0,02 и). Формалин по ГОСТ 1625—89, раствор 400 г/дм³ (40 %-ный).

Кислота серная по ГОСТ 4204—77, раствор 0,05 моль/дм³ (0,1 и).

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Индикатор смешанный (Таширо).

• Приготовление реактивов

Нейтрализованный формалин

Формалин нейтрализуется в день анализа раствором 0,1 моль/дм³ (0,1 и) гидроксида натрия до pH = 7.

Индикатор смешанный

0,12 г метилового красного и 0,08 г метиленового синего растворяют отдельно в небольшом количестве спирта 900 г/дм³ (90 %-ного). Растворы сливают в мерную колбу вместимостью 100 см³, объем доводят спиртом до метки.

6.5.2A Проведение анализа

Сначала проводят контрольное титрование.

В стеклянный стакан наливают 20 см³ дистиллированной воды, помещают магнит. В стакан помещают электроды, приливают 10 см³ нейтрализованного формалина, включают мешалку и титру- ют жидкость раствором 0,02 моль/дм³ гидроксида натрия до pH = 9.

При проведении рабочего анализа в стакан вместимостью 50 см³ помещают 0,2—0,3 г исследуемо- го образца, взвешенного с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, и доводят объем дистиллиро- ванной водой до 20 см³. В стакан опускают магнит, электроды.

Раствор нейтрализуют 0,1 моль/дм³ гидроксида натрия до pH 6,8—7,0.

При работе с очень кислым гидролизатом (pH 1,0) начинать нейтрализацию удобнее раствором 1 моль/дм³ (1 н) гидроксида натрия, постепенно переходя к концентрации 0,1 моль/дм³ и 0,02 моль/дм³.

По окончании нейтрализации в гидролизат добавляют 10 см³ формалина (pH 4,5—5,5) и титруют раствором 0,02 моль/дм³ (0,02 н) гидроксида натрия до pH 9.

6.5.2.5.            Обработка результатов

Массовую долю аминного азота (Х₂₅) в процентах вычисляют по формуле

(V - У\) ■ К ■ 0,28 • 100 ^{Xj5 =}                       т • 1000                     ’

где V — объем раствора гидроксида натрия 0,02 моль/дм³, израсходованный на титрование иссле- дуемого образца, см³;

V_l — объем раствора гидроксида натрия 0,02 моль/дм³, израсходованный на титрование конт- рольного образца, см³;

К—коэффициент пересчета на точный раствор 0,02 моль/дм³ гидроксида натрия;

0,28 — количество аминного азота, соответствующее 1 см³ раствора 0,02 моль/дм³ гидроксида натрия, мг;

1000 — коэффициент пересчета мг в г;

т — навеска исследуемого образца, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,2 %.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

Навеску образца гидролизата 0,2—0,3 г отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г и дальше проводят определение по п. 3.5.1.3.

6.8.1.           Сущность метода

Метод основан на извлечении перекиси водорода из навески белковой массы водой и количе- ственном определении ее титрованием.

6.8.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Колбы конические по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 и 250 см³ по ГОСТ 24104—88.

Колба мерная по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³.

Колбы конические по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 и 250 см³.

Пипетка по ГОСТ 29227—91, вместимостью 5 и 10 см³.

Бюретка по ГОСТ 29251—91, вместимостью 25 см³.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336—82, диаметром 50—70 мм.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490—75, раствор 0,01 моль/дм³ (0,05 и).

Кислота серная по ГОСТ 4204—77, раствор 100—150 г/дм³ (10—15 %-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

6.8.3.           Проведение анализа

Навеску анализируемого продукта массой от 9 до 10 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, количественно переносят дистиллированной водой через воронку в мерную колбу вместимостью 100 см³. Количество воды должно быть не более ²/₃ объема колбы. Содержимое колбы перемешивают и настаивают в течение 10 мин, периодически взбалтывая. В колбу доливают дистилли- рованную воду до метки, содержимое перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр в чистую сухую колбу. Отбирают пипеткой в коническую колбу 10 см³ фильтрата, приливают 5 см³ серной кислоты 100—150 г/дм³ и титруют раствором 0,01 моль/дм³ перманганата калия до появления слабо- розовой окраски.

Одновременно проводят контрольный анализ с навеской исследуемого продукта до обработки его перекисью водорода.

6.8.4.           Обработка результатов

Массовую долю перекиси водорода в белковой массе (Х₂₆) в процентах вычисляют по формуле

_ (V -У_х) ■ К- 0,00085 ■ У_г 100

где V — объем раствора марганцовокислого калия 0,01 моль/дм³, израсходованный на титрова- ние 10 см³ рабочего образца, см³;

Fj —объем раствора марганцовокислого калия 0,01 моль/дм³, израсходованный на титрова- ние 10 см³ контрольного образца, см³;

У₂ — объем вытяжки, см³;

У₃ — объем фильтрата, взятый для титрования, см³;

К — коэффициент пересчета на точный раствор 0,01 моль/дм³ перманганата калия;

0,00085 — количество перекиси водорода, соответствующее 1 см³ 0,01 моль/дм³ раствора перманга- ната калия, г;

т — навеска исследуемого образца, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,05 %.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

6.9.1.           Сущность метода

Метод основан на извлечении из белка водорастворимой фракции, обезвоживании нераствори- мой части центрифугированием, выпариванием, высушиванием и весовом определении ее.

6.9.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Центрифуга.

Шкаф сушильный.

Эксикатор по ГОСТ 25336—82.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) с притертой крышкой по ГОСТ 25336—82.

Колба мерная по ГОСТ 1770—74, вместимостью 250 см³.

Пипетка по ГОСТ 29227—91, вместимостью 20 см³.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

6.9.3.           Проведение анализа

Навеску рыбного белка (с известной массовой долей воды) массой от 4,5 до 5 г растирают в ступке с небольшим количеством дистиллированной воды в течение 3—5 мин и количественно перено- сят в мерную колбу вместимостью 250 см³. Колбу доливают водой до метки и, закрыв пробкой, содержимое взбалтывают, переворачивая колбу 10—15 раз. Содержимое колбы центрифугируют в течение 20 мин со скоростью 1000 об/мин. Пипеткой отбирают 20 см³ центрифугата и переносят в предварительно высушенную и тарированную бюксу.

Бюксу с центрифугатом помещают в сушильный шкаф и выпаривают жидкость при темпера- туре не выше 70 °С.

Остаток в бюксе сушат еще 2 ч при температуре 100—105 °С, затем охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

6.9.4.           Обработка результатов

Растворимость рыбного белка (Х₂₁) в процентах вычисляют по формуле

_     /и, ■ 100 ■ V_v 100

²⁷ т₂ ■ V₂ (100 - т) ’

где т — массовая доля воды в рыбном белке, %;

т_{ — масса сухого остатка после выпаривания 20 см³ центрифугана, г; т₂ — масса рыбного белка, г;

Pj — объем раствора в мерной колбе, см³;

V₂ — объем центрифугата, отобранный для высушивания, см³.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 1 %.

Вычисления проводят до единицы.

6.10.1.            Сущность метода

Метод основан на визуальном определении прозрачности гидролизата в проходящем свете и растворимости.

6.10.2.            Проведение анализа

5 г гидролизата, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, растворяют, помеши- вая, в 250 см³ дистиллированной воды температурой 18—20 °С.

Прозрачность раствора и отсутствие нерастворимого осадка определяют визуально.

Таблетку концентрата растворяют в 200 см³ горячей воды температурой 70—80 °С, перемешивая стеклянной палочкой.

Отсутствие нерастворимого осадка определяют визуально.

Навеску гидролизата разводят дистиллированной водой в соотношении 1:10 и определяют актив- ную кислотность по ГОСТ 28972—91.

• МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЖИРОВ, КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО СПЕРМАЦЕТА,
• МЕТОДЫ АНАЛИЗА КОРМОВОЙ МУКИ ИЗ РЫБЫ,
  • Подготовка средней пробы — по п. 2.6.

ЖИДКИХ ВИТАМИННЫХ ПРЕПАРАТОВ И СЫРЬЯ ДЛЯ ИХ ПРОИЗВОДСТВА

7.2.1.1.          Сущность метода

Метод основан на визуальном определении цвета жира в проходящем дневном свете.

7.2.1.2.          Аппаратура, материалы

Стакан химический бесцветного стекла по ГОСТ 25336—82, диаметром 50—100 мм.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °С по ГОСТ 28498-90.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919—83.

7.2.1.3.          Проведение анализа.

Часть профильтрованной средней пробы или жидкого витаминного препарата наливают в ста- кан диаметром 50—100 мм из бесцветного стекла (слабоокрашенный жир или препарат наливают в стакан диаметром 100 мм).

Жир или жидкий витаминный препарат нагревают до температуры, при которой проводится определение прозрачности, и рассматривают в проходящем дневном свете, определяя цвет и отте- нок.

7.2.2.1.          Сущность метода

Метод основан на сравнении цвета жира с цветом стандартных стеклянных фильтров.

7.2.2.3.          Аппаратура, реактивы

Цветомер ВНИИЖ-16 (черт. 7).

Растворитель.

Цветомер ВНИИЖ-16 состоит из кор- пуса с вмонтированной оптической систе- мой цветных фильтров, осветителя, основ- ными частями которого являются кожух с белой, рассеивающей свет, поверхностью экрана, двух ламп накаливания, набора кювет различной длины.

Прибор предназначен для измерения цвета жира, выражаемого числом красных единиц в интервале от 2 до 70 при 20—125 желтых.

В световой поток, прошедший через верхнее окно прибора, могут быть введе- ны:

- желтые фильтры, выделяющие по- токи, равные 20, 35 и 70 единицам желтого цвета;

- красные фильтры, выделяющие потоки, равные 10, 20 и 30 единицам красного цвета;

-двойной клин, позволяющий получать переменные световые потоки в интервале 1—10 еди- ниц красного цвета.

Правая половина поля зрения освещается током, прошедшим через слой жира, левая — через систему цветных фильтров.

Прибор должен быть установлен перед осветителем так, чтобы освещенность полей зрения окуляра была одинаковой. При правильной установке граница между полями должна быть отчетли- во видна.

7.2.2A Подготовка пробы

Пробу анализируемого жира нагревают до температуры, при которой предусмотрено опреде- ление его прозрачности. При заполнении кюветы жиром не должно быть воздушных пузырьков.

1.22.5.      Проведение анализа

Заполненную жиром кювету с толщиной слоя 50 мм ставят перед нижним окном прибора и, введя в поток желтый фильтр, уравнивают окраску обеих половин поля зрения перемещением кли- на. Измерения проводят с таким желтым фильтром (или суммой фильтров), с которым наилучшим образом выравнивается окраска.

Если перемещением клина не достигается равенство окраски, вводят последовательно допол- нительные красные фильтры 10, 20 и 30 единиц красного цвета. В этом случае к отсчету, получен- ному по шкале красного клина, добавляют соответствующее число красных единиц. Значение цвета получают как среднее арифметическое 3—5 измерений.

Перед заполнением кюветы новой порцией жира и после окончания измерений кювету про- мывают растворителем или теплой водой с мылом и высушивают при слабом нагревании.

Разборка цветомера ЦНИИЖ-16 не допускается, так как при этом нарушается юстировка прибора и градуировка его шкалы.

7.2.3.1.           Сущность метода

Метод основан на определении величины оптической плотности жира.

7.2.3.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерений оптической плотности от 0 до 1,3.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Эфир медицинский по Госфармакопее СССР.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76.

Колба плоскодонная по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 см³.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336—82.

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 28498—90 с пределом измерений температуры от 0 до 150 °С.

Пробу анализируемого жира при необходимости нагревают до температуры, при которой пре- дусмотрено определение его прозрачности и фильтруют через бумажный фильтр. Профильтрован- ный жир наливают в кювету с рабочей длиной 3—10 мм (в зависимости от цвета жира) и определяют оптическую плотность при длине волны 440 нм по сравнению с пустой кюветой. Если после филь- трации жир остается непрозрачным, его нагревают до 40 °С.

Перед заполнением кюветы новой порцией жира и после окончания измерения его оптичес- кой плотности кювету промывают спирто-эфирной смесью (1:2) и высушивают.

7.2.3.4.           Обработка результатов

Оптическую плотность (Е₁) в относительных единицах, характеризующую цвет жира, вычис- ляют по формуле

где Е — оптическая плотность исследуемого жира; / — рабочая длина кюветы, мм.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух па- раллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,015 относительных единиц.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

Цвет жира, соответствующий полученному значению оптической плотности, устанавливают по табл. 6.

7.3.1.           Сущность метода

Метод основан на визуальном определении прозрачности жира, нагретого до требуемой тем- пературы, в проходящем и отраженном свете.

7.3.2.           Аппаратура

Баня водяная.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³.

Стакан химический по ГОСТ 25336—82, вместимостью 200—300 см³.

Термостат.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °С по ГОСТ 28498-90.

Палочка стеклянная.

7.3.3.           Проведение анализа

Перед анализом жир, помещенный в химический стакан, осторожно нагревают на водяной бане до температры 60—70 °С (медицинский рыбий жир должен иметь температуру 5 °С).

100 см³ жира переносят в цилиндр, медленно охлаждают при непрерывном перемешивании стеклянной палочкой до температуры, предусмотренной для определения прозрачности, и выдер- живают в течение 3 ч при установленной температуре, периодически помешивая через каждые 15 мин.

По истечении указанного времени жир рассматривают в проходящем и отраженном свете на белом фоне.

Жир считается прозрачным, если в нем нет мути или взвешенных частиц.

7.4.1.           Сущность метода

Метод основан на определении отношения массы жира к массе воды при установленных для них температурах.

7.4.2.           Аппаратура, материалы и реактивы.

Пикнометры стеклянные по ГОСТ 22524—77, градуированные при температуре 20 °С.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °С по ГОСТ 28498-90.

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Баня водяная.

Пипетки по ГОСТ 29227—91.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

7.4.3.          Проведение анализа

Пикнометр тщательно промывают хромовой смесью, водой, спиртом, просушивают и взвеши- вают на аналитических весах.

Для определения массы воды (водного числа) взвешенный пикнометр наполняют выше метки дистиллированной водой. Температуру воды доводят до 20 °С погружением пикнометра в водяную баню данной температуры на 20—30 мин, после чего доводят уровень воды в пикнометре до метки удалением излишка ее с помощью полосок фильтровальной бумаги.

Пикнометр вынимают из бани, тщательно вытирают снаружи и взвешивают.

После удаления воды пикнометр высушивают, вновь взвешивают, наполняют профильтрован- ным жиром (с некоторым избытком), доводят до температуры 20 °С (или указанной в стандарте на данный вид жира) погружением в водяную баню, имеющую ту же температуру, и выдерживают в ней пикнометр до тех пор, пока уровень мениска не перестанет изменяться. Избыток жира отбира- ют фильтровальной бумагой, свернутой в тонкую трубочку. После этого пикнометр с жиром тща- тельно вытирают и взвешивают.

Относительную плотность жира (р^) вычисляют по формуле

_л20 _ m2 - т Р20 ^— т\ - т ’

где т — масса пустого пикнометра, г; т_{ — масса пикнометра с водой, г; т₂ — масса пикнометра с жиром, г.

9П

Относительную плотность р₄ вычисляют по формуле

20 20 „ _ппо, р₄ — Р20 ■ 0,9982 ,

9П

где р₂₀ — относительная плотность жира, определенная при 20 °С;

0,9982 — плотность воды при 20 °С.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,001 условных единиц.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

7.5.1.          Сущность метода

Метод основан на осаждении из жира в период отстаивания веществ нежирового характера, имеющих большую плотность, и определении их количества измерением объема.

7.5.2.          Проведение анализа

После тщательного перемешивания пробы отбирают 100 см³ жира и вносят его в стеклянный мерный цилиндр вместимостью 100 см³, оставляют на 24 ч, после чего измеряют объем, занимаемый отстоем.

Определение проводят при температуре, установленной стандартом на исследуемый жир. Ко- личество отстоя выражают в объемных единицах.

7.6.1.          Сущность метода

Метод основан на растворении жировой фракции липидов органическим растворителем, отде- лении веществ нежирового характера фильтрованием, обезвоживании их высушиванием и опреде- лении массы взвешиванием.

7.6.2.          Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Шкаф сушильный.

Колбы конические по ГОСТ 25336—82 вместимостью 250—300 см³.

Секундомер механический.

Эксикатор по ГОСТ 25336—82.

Бюксы по ГОСТ 25336—82.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °С по ГОСТ 28498-90.

Палочка стеклянная.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336—82, диаметром 100 мм.

Воронка для горячего фильтрования.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76.

Эфир петролейный, температурой кипения 40—60 °С или бензин-растворитель для резиновой промышленности по ГОСТ 443—76 температурой кипения до 90 °С.

7.6.3.           Проведение анализа

Из разогретой и тщательно перемешанной пробы жира в коническую колбу вместимостью 250—300 см³ отбирают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г навеску массой 50 г и растворяют в равном объеме петролейного эфира или бензина. Полученный раствор фильтруют через предва- рительно доведенный до постоянной массы при 100—105 °С фильтр. Колбу тщательно промывают эфиром или бензином, который фильтруют через тот же фильтр. Остаток на фильтре промывают небольшими порциями эфира или бензина до полного удаления жира, после чего фильтр с остат- ком в той же бюксе высушивают до постоянной массы при 100—105 °С.

При отсутствии бензина или достаточного количества петролейного эфира навеску жира филь- труют через воронку для горячего фильтрования при температуре не выше 60 °С, остаток на фильтре промывают петролейным или серным эфиром, после чего фильтр с остатком доводят до постоян- ной массы при 100—105 °С.

7.6.4.           Обработка результатов

Массовую долю примесей в жире (Х₂₈) в процентах вычисляют по формуле

(т₂ - тО • 100

^²⁸ “ т

где т — навеска жира, г;

т_{ — масса высушенного бумажного фильтра с бюксой, г;

т₂ — масса бумажного фильтра с высушенным остатком и бюксой, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,02 %.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

7.8.1.           Сущность метода

Метод основан на визуальном определении момента начала движения жира в капилляре под давлением столба воды.

7.8.2.           Аппаратура

Баня водяная.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °С по ГОСТ 28498-90.

Стакан химический по ГОСТ 25336—82.

Трубка капиллярная стеклянная с внутренним диаметром 1,0—1,5 мм и длиной 100—120 мм.

Секундомер механический.

7.8.3.           Проведение анализа

Для наполнения спермацетом тонкостенной капиллярной трубки с внутренним диаметром 1,0—1,5 мм и длиной 100—120 мм (предварительно хорошо вымытой и высушенной) опускают конец капилляра в расплавленный на водяной бане спермацет и заполняют его на 10—20 мм по высоте.

Заполненный капилляр охлаждают холодной водой. Капилляр с застывшим спермацетом при- крепляют к термометру так, чтобы столбик спермацета находился против шарика, и погружают термо- метр с капилляром в химический стакан с водой, предварительно нагретой до температуры 25 °С.

Ртутный резервуар термометра помещают ниже поверхности воды на 4 см и осторожно, переме- шивая воду мешалкой, нагревают ее.

Показания термометра в момент, когда спермацет под напором столба воды поднимается в капилляре вверх, принимают за температуру плавления.

Температуру водяной бани поднимают со скоростью не более 1 °С в мин. Около точки перехо- да спермацета в жидкое состояние скорость повышения температуры должна быть не более 0,5— 0,75 °С в мин.

7.9.1.           Сущность метода

Метод основан на взаимодействии свободных жирных кислот, содержащихся в 1 г жира, с гидроксидом калия.

7.9.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Секундомер механический.

Баня водяная.

Колбы конические с притертой пробкой по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250 см³.

Колба коническая с боковой отводной трубкой.

Капельница по ГОСТ 25336—82.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770—74, вместимостью 50 см³.

Холодильник стеклянный лабораторный (обратный) по ГОСТ 25336—82.

Бюретки по ГОСТ 29251—91, вместимостью 25 и 50 см³.

Фенолфталеин (1 %-ный).

Калия гидроксид по ГОСТ 24363—80, раствор 0,1 моль/дм³ (0,1 н) или натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, раствор 0,1 моль/дм³ (0,1 н).

Эфир медицинский по Госфармакопее СССР.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Алкалиблау 6Б.

Тимолфталеин, спиртовой раствор 10 г/дм³ (1 %-ный).

7.9.3.          Проведение анализа

В коническую колбу вместимостью 250 см³ отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г (в зависимости от ожидаемого кислотного числа) 2—10 г профильтрованного жира или 1—2 г препарата «Витамин А в жире», или концентрата витамина А, приливают 30—50 см³ нейтрализован- ной (по тому индикатору, с которым проводится титрование) смеси спирта с этиловым эфиром (1:2) и перемешивают взбалтыванием. Если при этом жир не растворяется, содержимое колбы слегка нагре- вают на водяной бане с обратным холодильником, а затем охлаждают до температуры 15—20 °С. В полученный раствор прибавляют 1 см³ спиртового раствора фенолфталеина 10 г/дм³ и при постоянном взбалтывании быстро титруют раствором гидроксида калия 0,1 моль/дм³ или натрия до появления слабо-розовой окраски, устойчивой в течение 30 с.

Во избежание гидролиза раствора мыла количество спирта в нейтрализованной смеси должно превышать количество гидроксида натрия или калия, пошедшее на титрование, в 5 раз.

При исследовании темно-окрашенных жиров титрование лучше вести в конической колбе с боковой отводной трубкой с добавлением 2 см³ спиртового раствора тимолфталеина 10 г/дм³ в качестве индикатора или 20 см³ спиртового раствора 20 г/дм³ алкалиблау 6Б.

Наблюдают за изменением окраски смеси во время титрования в тонком слое, находящемся в отводной трубке колбы.

Тимолфталеин в кислой среде бесцветен, а в щелочной дает голубое окрашивание; при титрова- нии темно-окрашенных жиров он принимает голубовато-зеленый или грязно-зеленый цвет.

7.9.4.          Обработка результатов

Кислотное число исследуемого жира (Х₂₉) в мг КОН на 1 г жира вычисляют по формуле

^            5,61 ■ К V

— ,

П                 _т

где V — объем раствора гидроксида калия или гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный на титрование, см³;

К— коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм³ щелочи;

5,61 — количество гидроксида калия, соответствующее 1 см³ точного раствора 0,1 моль/дм³, мг; т — масса исследуемого жира, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,1 мг КОН.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

7.10.1.           Сущность метода

Метод основан на взаимодействии свободных и связанных жирных кислот, содержащихся в 1 г жира, со щелочью и определении числа омыления обратным титрованием.

7.10.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Баня водяная.

Колбы конические по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250 см³ со шлифом.

Холодильник стеклянный лабораторный (обратный) по ГОСТ 25336—82.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 50 см³.

Бюретка по ГОСТ 29251—91, вместимостью 25—50 см³.

Кислота соляная по ГОСТ 3118—77, раствор 0,5 моль/дм³ (0,5 н.).

Фенолфталеин, спиртовой раствор 10 г/дм³ (1 %-ный) или алкалиблау спиртовой раствор 20 г/дм³ (2 %-ный) (при анализе темноокрашенных жиров).

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Калия гидроксид по ГОСТ 24363—80, спиртовой раствор 0,5 моль/дм³ (0,5 н).

7.10.3.            Приготовление спиртового раствора 0,5 моль/дм³ гидроксида калия

30 г гидроксида калия растворяют в 20 см³ воды в мерной колбе вместимостью 1 дм³ и доливают до метки этиловым спиртом.

Раствор оставляют на сутки для отстаивания в закрытой колбе.

Прозрачный раствор осторожно декантируют в склянку из темного стекла.

7.10.4.            Проведение анализа

В колбу для омыления отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г 1,5—2 г хорошо перемешанного и профильтрованного жира и приливают из бюретки 25 см³ спиртового раствора гидроксида калия 0,5 моль/дм³. Колбу соединяют с обратным холодильником, глубоко опускают в сильно кипящую водяную баню и кипятят 1 ч при периодическом взбалтывании до полного омыления жира.

Об окончании реакции омыления судят по отсутствию помутнения пробы от нескольких ка- пель воды.

К полученному горячему прозрачному мыльному раствору приливают 0,5 см³ раствора фенол- фталеина 10 г/дм³ или при анализе темноокрашенных жиров раствора алкалиблау 20 г/дм³ и сразу титруют раствором соляной кислоты 0,5 моль/дм³ до нейтральной реакции.

Одновременно проводят контрольный анализ без навески жира.

7.10.5.            Обработка результатов

Число омыления исследуемого жира (Х₃₀) в мг КОН на 1 г жира вычисляют по формуле

_ 28,055 ■ К ■ (V - VО

где 28,055 — количество гидроксида калия, соответствующее 1 см³ раствора соляной кислоты 0,5 моль/дм³, мг;

К — коэффициент пересчета на точный раствор соляной кислоты 0,5 моль/дм³;

V — объем раствора соляной кислоты 0,5 моль/дм³, израсходованный на титрование ра- створа в контрольном анализе, мл;

V_l — объем раствора соляной кислоты 0,5 моль/дм³, израсходованный на титрование в ра- бочем анализе, см³; т — навеска жира, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 2,0 мг.

Вычисление проводят до единицы.

7.11.1.1.             Сущность метода

Метод основан на взаимодействии йода с непредельными жирными кислотами жира.

7.11.1.2.             Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Колбы с притертой пробкой по ГОСТ 25336—82, вместимостью 500 см³.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³.

Бюретки по ГОСТ 29251—91, вместимостью 50, 25 см³ с делениями на 0,1 см³.

Капельницы по ГОСТ 25336—82.

Ртуть двухлористая (сулема) по Госфармакопее СССР.

Йод по ГОСТ 4159-79.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Кислота соляная по ГОСТ 3118—77.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), водный раствор 0,1 моль/дм³.

Калий йодистый по ГОСТ 4232—74, водный раствор 100 г/дм³ (10 %-ный) (не содержащий йодноватокислой соли).

Хлороформ по Госфармакопее СССР, не содержащий перекисей, остающийся бесцветным после взбалтывания его с йодистым калием.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163—76, раствор 10 г/дм³ (1 %-ный), к которому прибавля- ют кристалл для стойкости при хранении.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

7.11.1.3.             Приготовление йодно-ртутного раствора

Йодно-ртутный раствор (раствор Гюбля) готовят смешиванием отдельно приготовленных спир- товых растворов двухлористой ртути (сулемы) и йода.

25 г йода растворяют в 500 см³ спирта 950 г/дм³, а 30 г сулемы растворяют в 500 см³ спирта 950 г/дм³ и профильтровывают. Оба раствора хранят в отдельных склянках из темного стекла с притер- тыми пробками и смешивают в равных объемах за 48 ч до начала определения.

7.11.1.4.             Определение испытания

В конической колбе с притертой пробкой взвешивают 0,2 г профильтрованного жира с абсо- лютной погрешностью не более 0,0002 г, приливают 15—20 см³ хлороформа, свободного от переки- сей, и 25 см³ йодно-ртутного раствора. Колбу закрывают притертой пробкой, смоченной раствором йодистого калия во избежание улетучивания йода. Содержимое колбы осторожно перемешивают. Колбу ставят в темное место при температуре 20 °С на 24 ч.

По окончании настаивания в колбу приливают 15 см³ раствора йодистого калия 100 г/дм³ и 100 см³ дистиллированной воды. Если при этом выпадает осадок йодистой ртути, не растворяющейся при взбалтывании, доставляют еще 5 см³ раствора йодистого калия.

Смесь взбалтывают и титруют выделившийся йод раствором серноватистокислого натрия 0,1 моль/дм³ до светло-желтой окраски. После этого прибавляют 1 см³ раствора крахмала 10 г/дм³ и продолжают титрование до исчезновения синего окрашивания.

Одновременно проводят контрольное определение без навески жира.

7.11.1.5.             Обработка результатов

Йодное число (Х₃₁) в г йода на 100 г жира вычисляют по формуле

0,01269 • К ■ (V - Vy) • 100

где 0,01269 — количество йода, соответствующее 1 см³ раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³, г; К — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм³ тиосульфата натрия;

• — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный в контрольном
• — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный в рабочем анали-
• — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный в контрольном
• — объем, в котором растворена минерализованная навеска, см³;

анализе, см³;

зе, см³;

т — навеска жира, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 1 г йода.

Вычисление проводят до единицы.

7.11.2.2.             Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Колбы по ГОСТ 25336—82 с притертой пробкой вместимостью 350—500 см³.

Колбы мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 1 дм³.

Пипетки стеклянные по ГОСТ 29227—91, вместимостью 1; 3 и 10 см³.

Часы песочные на 5, 10 и 15 мин.

Воронка делительная по ГОСТ 25336—82, вместимостью 500 см³.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³ с делениями через 1 см³.

Хлороформ по Госфармакопее СССР.

Кислота соляная по ГОСТ 3118—77.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

Эфир медицинский по Госфармакопее СССР, свободный от перекисей.

Калий йодистый по ГОСТ 4232—74, водный раствор 100 г/дм³ (10 %-ный).

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), водный раствор 0,1 моль/дм³.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163—76, раствор 10 г/дм³ (1 %-ный) свежеприготовленный.

Калий йодноватокислый по ГОСТ 4202—75.

7.11.2.3.             Приготовление раствора хлористого йода 0,2 моль/дм³ (0,2 н)

В склянку с притертой пробкой вносят 11,1 г йодистого калия, 7 г йодноватокислого калия, 50 см³ воды, 50 см³ концентрированной соляной кислоты и взбалтывают до полного растворения йода. Приливают 20 см³ хлороформа и добиваются фиолетовой окраски слоя хлороформа добавле- нием по каплям водного раствора йодноватокислого калия 10 г/дм³ при энергичном взбалтывании.

После отстаивания водный слой сливают в мерную колбу и доводят объем водой до 1 дм³. Реактив хранят в склянке темного стекла.

7.11.2.4.             Проведение анализа

В колбу с притертой пробкой отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г 0,08—0,12 г профильтрованного жира.

Для растворения жира в колбу приливают 3 см³ этилового эфира, свободного от перекисей, и добавляют из бюретки 25 см³ 0,2 моль/дм³ солянокислого раствора хлористого йода.

Колбу плотно закрывают пробкой, перемешивают и оставляют стоять 5—10 мин, затем вносят 10 см³ раствора йодистого калия 100 г/дм³, 50 см³ дистиллированной воды и выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³ до светло-желтой окраски.

После этого в колбу прибавляют 1 см³ свежеприготовленного раствора крахмала 10 г/дм³, 2—3 см³ хлороформа, свободного от перекисей, и продолжают титрование до полного исчезновения синего окрашивания.

Одновременно проводят контрольное определение без навески жира.

7.11.2.5.             Обработка результатов

Йодное число (Х_п) в г йода на 100 г жира вычисляют по формуле

0,01269 • К ■ (V - V_x) • 100

где 0,01269 — количество йода, соответствующее 1 см³ раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³, г; К — коэффициент пересчета на точный раствор тиосульфата натрия 0,1 моль/дм³;

анализе, см³;

• — объем раствора тиосульфата натря 0,1 моль/дм³, израсходованный в рабочем анализе,
  • Определение перекисного числа
  • Методы определения витаминов A, D и Е в тканях и органах (печень и др.) рыб, жирах рыб, морских млекопитающих и в жидких витаминных препаратах
    • Определение витаминов А и D в жирах рыб и мор- ских млекопитающих
    • Определение витамина А в тканях и органах (пе- чень и др.) рыб, морских млекопитающих, морских беспоз- воночных и продуктах их переработки колориметрическим методом
      • Подготовка и очистка реактивов
    • Определение витамина Е в жире —по ГОСТ 9393—82.
  • Определение внешнего вида муки
  • Определение крупности помола
  • Определение содержания металлопримесей в кормовой рыбной муке
  • Определение размера металлопримесей
    • Сущность метода — по п. 8.3.1.
    • Аппаратура и материалы — по п. 8.3.2.
    • Проведение анализа
  • Определение воды — по ГОСТ 13496.3—92.
  • Определение хлористого натрия — по пи. 3.5.1 и 3.5.3.
  • Определение жира — по пи. 3.7.1; 3.7.2; 3.7.4.
  • Методы определения белковых веществ (сырого протеина)
    • Определение массовой доли белковых веществ макро- методом
      • Приготовление раствора смешанного индикатора — по и. 6.5.2.3.
    • Определение   массовой   доли  белковых   веществ   макро-
    • Определение   массовой   доли  белковых   веществ   макро-
      • Аппаратура, материалы и реактивы по п. 8.9.1.2 со следующими дополнениями:
    • Содержание белковых веществ (сырого протеина) в кормовой рыбной муке, направляемой на производство ком- бикормов—по ГОСТ 13496.4—93*.
  • Методы определения антиокислителя-ионола
    • Определение массовой доли ионола колориметриче- ским методом

см³;

т — навеска жира, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 3 г.

Вычисление проводят до единицы.

7.12.1.           Сущность метода

Метод основан на взаимодействии перекисей, содержащихся в жире, с йодистым калием в присутствии ледяной уксусной кислоты с выделением йода, который оттитровывают раствором тиосульфата натрия.

7.12.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Баня водяная.

Часы песочные на 2 мин или секундомер.

Колбы с притертой пробкой по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250—300 см³.

Микробюретка по ГОСТ 29251—91, вместимостью 10 см³ с делениями на 0,01—0,02 см³.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 50 и 100 см³.

Пипетки по ГОСТ 29227—91, вместимостью 1 см³.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), раствор 0,01 моль/дм³.

Хлороформ по Госфармакопее СССР.

Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61—75.

Калий йодистый по ГОСТ 4232—74, насыщенный водный раствор.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163—76, водный раствор 10 г/дм³ (1 %-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

7.12.3.           Проведение анализа

В коническую колбу с притертой пробкой вносят навеску тщательно перемешанного и про- фильтрованного жира массой 1 г, взятую с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г.

Китовые жиры предварительно осторожно подогревают на водяной бане до температуры 60—70 °С. Навеску жира в колбе растворяют в 30 см³ смеси, состоящей из 12 см³ хлороформа и 18 см³ ледяной уксусной кислоты. К раствору приливают 1 см³ насыщенного на холоде раствора йодистого калия и смесь равномерно взбалтывают точно 2 мин.

В колбу добавляют 100 см³ свежепрокипяченной дистиллированной воды, 1 см³ раствора крах- мала 10 г/дм³ и немедленно титруют в присутствии крахмала выделившийся йод раствором тиосуль- фата натрия 0,01 моль/дм³ до исчезновения синего окрашивания. Одновременно проводят кон- трольный анализ без навески жира.

7.12.4.           Обработка результатов

Перекисное число исследуемого жира (Х₃₃) в процентах йода вычисляют по формуле

(Vy - V) • 0,001269 • К ■ 100

где V_l — объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм³, израсходованный на титрование в рабочем анализе, см³;

Г —объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм³, израсходованный на титрование в контрольном анализе, см³; т — навеска жира, г;

К — коэффициент пересчета на точный раствор тиосульфата натрия 0,01 моль/дм³ (0,01 н); 0,001269 — количество йода, соответствующее 1 см³ точного раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм³, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,02 %.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

7.13.          Определение неомыляемых веществ 7.13.1. Сущность метода

Метод основан на омылении триглицеридов щелочью, экстракции неомыляемых веществ эти- ловым спиртом, обезвоживании и определении их количества взвешиванием.

7.13.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Баня песочная.

Шкаф сушильный.

Колбы конические со шлифом по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250—300 см³.

Холодильник стеклянный лабораторный (обратный) по ГОСТ 25336—82 со шлифом.

Воронка делительная по ГОСТ 25336—82, вместимостью 500 см³.

Колбы с притертой пробкой по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250—350 см³.

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 28498—90 с пределом измерений температуры от 0 до 150 °С.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 25 и 100 см³.

Воронка по ГОСТ 25336—82, диаметром 50 мм.

Холодильник стеклянный лабораторный (водяной) по ГОСТ 25336—82.

Аллонж по ГОСТ 25336—82.

Колба коническая по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250—350 см³.

Капельница по ГОСТ 25336—82.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76.

Калия гидроксид по ГОСТ 24363—80, спиртовой раствор 2 моль/дм³ (2 н).

Эфир медицинский по Госфармакопее СССР.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166—76.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Фенолфталеин, спиртовой раствор 10 г/дм³ (1 %-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

7.13.3.           Проведение анализа

В коническую колбу взвешивают 2—3 г с абсолютной погрешностью не более 0,001 г тщатель- но перемешанного и профильтрованного жира. Китовые жиры предварительно подогревают на водяной бане до температуры 60—79 °С. К навеске жира приливают 20 см³ свежеприготовленного спиртового раствора гидроксида калия 2 моль/дм³ и, отметив уровень раствора, нагревают колбу на песочной бане с обратным холодильником в течение 2 ч (1 ч для рыбьих жиров). Уровень раствора доводят этиловым спиртом до первоначального и прибавляют 80 см³ дистиллированной воды.

После этого содержимое колбы нагревают еще 30 мин. Полученный раствор должен быть прозрачным. После охлаждения раствор количественно переносят в делительную воронку и экстра- гируют неомыляемые вещества этиловым эфиром. При образовании эмульсии к эфирному раствору добавляют несколько капель спирта для расслоения. Экстракцию проводят в три приема, используя для первой экстракции 50 см³ эфира, для последующих — по 25 см³.Собранные вместе в делитель- ной воронке эфирные вытяжки промывают водой до полного удаления раствора мыла, о чем свиде- тельствует исчезновение окраски промывных вод при реакции с фенолфталеином.

Эфирный раствор количественно переносят через воронку с фильтром и безводным сернокис- лым натрием в предварительно высушенную и взвешенную колбу.

Эфир отгоняют на водяной бане с холодильником, остатки эфира удаляют на водяной бане без холодильника. Колбу с неомыляемыми веществами высушивают при температуре 100—105 °С до постоянной массы.

7.13.4.           Обработка результатов

Массовую долю неомыляемых веществ (Х₃₄) в процентах вычисляют по формуле

_ (т₂ - т_{) ■ 100

где т — навеска жира, г;

т_{ — масса пустой колбы, г;

т₂ — масса колбы с остатком после высушивания, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,2 %.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

Витамин А в препарате и витамины А и D в медицинском жире определяют по ФС 42-965-75.

Концентраты витамина А в жире, полученные методом молекулярной дистилляции и содержа- щие свыше 5000 ME витамина в 1 г, омылению не подвергают. Навеску концентрата в количестве 0,1— 0,2 г непосредственно растворяют в хлороформе в мерной колбе вместимостью 25 см³ с при- шлифованной пробкой. Колориметрирование и расчет проводят по ФС 42—965—75.

7.14.2.1.             Сущность метода

Метод основан на взаимодействии витамина А с треххлористой сурьмой с образованием окра- шенного комплекса.

7.14.2.2.             Аппаратура, материалы и реактивы

Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336—82.

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный по ГОСТ 28498—90 с пределом измерений тем- пературы от 0 до 150 °С.

Секундомер механический.

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3.

Воронки химические по ГОСТ 25336—82, диаметром 35—50 мм.

Колбы конические с притертой пробкой по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 см³.

Пипетка по ГОСТ 29227—91, вместимостью 1 и 5 см³.

Воронки делительные по ГОСТ 25336—82, вместимостью 300—500 см³.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³.

Баня водяная.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026—76.

Калия гидроксид по ГОСТ 24363—80, х. ч.

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, х.ч.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166—76, х. ч.

Бензидин-основание.

Азот газообразный по ГОСТ 9293—74.

Ангидрид уксусный по ГОСТ 5815—77, ч. д. а.

Кислота серная по ГОСТ 4204—77, ч. д. а.

Медь сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165—78, ч. д. а.

Фенолфталеин, спиртовой раствор 10 г/дм³ (1 %-ный).

Калий йодистый по ГОСТ 4232—74, ч. д. а.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490—75, х. ч.

Пирогаллол А по ТУ 6—09—5319—86, ч. д. а.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67.

Сурьма треххлористая.

Хлороформ по Госфармакопее СССР.

Эфир медицинский по Госфармакопее СССР.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

Азот

Для очистки от примесей азот пропускают последовательно через поглотители: щелочный раствор пирогаллола А (5 г пирогаллола на 100 см³ раствора КОН 500 г/дм³), концентрированную серную кислоту, стеклянную вату и безводный хлористый кальций.

Натрий сернокислый (безводный)

Безводный сернокислый натрий подсушивают при температуре 105—110 °С в течение 2—3 ч.

Спирт этиловый

Этиловый ректификованный спирт освобождают от альдегидов перегонкой над твердой гидроксидом калия или натрия или раствором 10 г на 1 дм³ спирта.

Начальную и конечную партии отгона отбрасывают.

Эфир этиловый

В склянку с корковой пробкой помещают 500 см³ эфира, 50 см³ раствора КМп0₄ 40 г/дм³, 5 см³ раствора NaOH 400 г/дм³ или КОН, взбалтывают содержимое и оставляют на сутки в темноте. Смесь (верхний слой) переносят в делительную воронку (нижний слой сливают), высушивают в течение суток сернокислым натрием, перегоняют и сохраняют в темноте.

Эфир необходимо проверять на отсутствие перекисей по качественной реакции с йодистым калием.

Хлороформ

Хлороформ промывают 5—6 раз дистиллированной водой (2:1), высушивают безводным сер- нокислым натрием, перегоняют в темную склянку и хранят в прохладном месте в течение 5—6 недель.

Хлороформ необходимо проверять на отсутствие свободного хлора, соляной кислоты и фосге- на. Наличие фосгена и соляной кислоты устанавливают с бензидином следующим образом: не- сколько кристаллов бензидина растворяют в 10 см³ хлороформа (в склянке с притертой пробкой) и оставляют на ночь. При наличии соляной кислоты и фосгена раствор становится мутным.

Треххлористая сурьма

Треххлористую сурьму промывают хлороформом до тех пор, пока хлороформ, используемый для промывки, не будет прозрачным и бесцветным. Высушивают промытую хлороформом треххло- ристую сурьму в эксикаторе над серной кислотой в течение 1—2 сут. в темноте.

Для приготовления раствора 230 г треххлористой сурьмы растворяют в колбе в 1 дм³ хлорофор- ма для наркоза при нагревании на теплой водяной бане. Колбу закрывают притертой пробкой и оставляют на ночь. Прозрачную часть раствора сливают в мерный цилиндр вместимостью 1 дм³, прибавляют 2 % (по объему) уксусного ангидрида, переносят в темную склянку, перемешивают и закрывают притертой пробкой. Раствор годен для анализа через сутки в течение 5—6 недель.

7.14.2.4.          Проведение анализа

К навеске исследуемой пробы массой 2—3 г, взятой с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, добавляют 1 см³ водного раствора КОН 600 г/дм³ и 10—20 см³ этилового спирта. Смесь нагревают на водяной бане при температуре 85—90 °С с обратным холодильником до полного рас- творения исследуемого образца, но не менее 2 ч. Если полного растворения не происходит, добав- ляют еще 10—20 см³ спирта и продолжают нагревание. После омыления жира к раствору добавляют 10—20 см³ спирта и двойное (по отношению к общему объему спирта) количество воды. Содержи- мое колбы количественно переносят в делительную воронку.

Неомыляемую фракцию трижды извлекают эфиром. Первый раз добавляют 50 см³ эфира, вто- рой и третий раз — по 30 см³. Во избежание образования стойкой эмульсии экстракцию эфиром проводят в хорошо охлажденном растворе и при осторожном перемешивании содержимого воронки.

Объединенные эфирные вытяжки промывают дистиллированной водой, добавляя по 30—40 см³ до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с фенолфталеином). Промы- тые эфирные вытяжки медленно фильтруют в колбу для отгона через бумажный фильтр, на кото- рый предварительно насыпают 8 г безводного сульфата натрия.

Фильтр с сульфатом натрия три раза промывают эфиром по 10 см³, собирая фильтрат в ту же колбу.

Эфир отгоняют в токе азота при температуре не выше 40 °С.

Остаток вначале растворяют в небольшом объеме хлороформа для наркоза, затем разбавляют тем же хлороформом так, чтобы в 1 см³ раствора содержалось около 30 ME витамина А.

0,4 см³ полученного хлороформного раствора переносят в кювету фотоэлектроколориметра с рабочей длиной 10 мм, быстро прибавляют 4 см³ хлороформного раствора хлорида сурьмы, содер- жащего 20 г/дм³ уксусного ангидрида, и измеряют оптическую плотность раствора фотоэлектроко- лориметром при длине волны 620 нм. Показания прибора отмечают не позднее, чем через 5 с после добавления в кювету хлороформного раствора хлорида сурьмы. Содержание витамина А, соответ- ствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

7.14.2.5.           Построение градуировочного графика

Навеску раствора ретинола ацетата в масле (для инъекции), содержащего 100000 ME в 1 см³ (фактическое содержание витамина А в 1 см³ раствора устанавливают как указано в ФС 42—101—72) массой 0,1 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, разводят в таком количест- ве хлороформа для наркоза, чтобы получить раствор, содержащий 100 ME витамина А в 1 см³.

Приготовленный раствор используют для получения ряда разведений с содержанием витамина А от 5 до 50 ME в 1 см³ с интервалом в 5 ME.

Из каждого разведения отбирают по 0,4 см³ раствора, проводят цветную реакцию в кювете с рабочей длиной 10 мм так же, как при анализе исследуемого раствора и определяют оптическую плотность при длине волны 620 нм.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс количест- ва витамина А, на оси ординат — соответствующие оптические плотности.

Градуировочный график строят каждый раз при смене реактивов, особенно треххлористой сурьмы.

7.14.2.6.           Обработка результатов

Массовую долю витамина А (Х₃₅) в 1 грамме исследуемого продукта (фарша) в международных единицах (ME) вычисляют по формуле

т ■ V

где т — содержание витамина А в 1 см³ раствора, найденное по градуировочному графику в между- народных единицах (ME);

V — разведение, см³; т_{ — навеска образца, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 10 %.

Вычисление проводят до единицы.

7.15. Определение ионола в ветеринарном жире — по ГОСТ 9393—82.

МОРСКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ И РАКООБРАЗНЫХ

8.2.1.          Сущность метода

Метод основан на визуальном определении внешнего вида муки.

8.2.2.          Проведение испытания

Среднюю пробу муки, рассыпанную тонким слоем на пергаментной бумаге, полимерной пленке или другом материале, внимательно просматривают на присутствие комков, плесени, величину гранул.

8.3.1.          Сущность метода

Метод основан на фракционировании частиц муки просеиванием ее через сито и определении массы фракции взвешиванием.

8.3.2.          Аппаратура и материалы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Сито диаметром 150 мм с сеткой проволочной стальной тканой для мукомольной промышлен- ности со стороной отверстия 3,2 мм.

Стакан химический по ГОСТ 25336—82, вместимостью 200 см³.

8.3.3.          Проведение анализа

Навеску муки массой 100 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,5 г, просеива- ют через сито с квадратными отверстиями, со стороной равной 3,2 мм.

Остаток крупных частиц на сите переносят в тарированный стакан и взвешивают. Масса ос- татка в граммах, выраженная в процентах от общей массы пробы, характеризует крупность помола.

8.4.1.          Сущность метода

Метод основан на извлечении ферромагнитных частиц магнитом и определении их массы взвешиванием.

8.4.2.          Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Лист стекла или плексигласа размером 500-500 мм.

Магнит.

Стакан химический по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 см³.

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, раствор 100 г/дм³ (10 %-ный).

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026—76.

Сита из сетки проволочной стальной тканой для мукомольной промышленности с размерами сторон 0,5 и 1,0 мм.

8.4.3.          Проведение анализа

Навеску муки массой 250 г, взятую из средней пробы без просеивания через сито и измельче- ния в ступке, рассыпают на стекле, плексигласе или мраморной доске слоем толщиной 5 мм и извлекают металлические частицы подковообразным магнитом. Во избежание потерь при снятии металлических частиц с магнита, его полюсы предварительно обертывают папиросной бумагой, через которую собирают металлопримеси. Для этого проводят магнитом продольные и поперечные бороздки по всей поверхности муки, чтобы покрыть ими весь образец муки без промежутков.

Снимают с магнита выбранные частицы железа, осторожно снимают бумагу с полюсов магни- та и ссыпают металлические частицы на чистый лист белой бумаги. Образец муки заравнивают и повторяют обработку магнитом. Эту операцию проводят несколько раз до тех пор, пока на магните не будут больше собираться частицы железа.

После этого, держа за края бумагу, на которой собрано железо, водят ее по полюсам магнита и осторожно сдувают примешанную муку так, чтобы металлические частицы во время сдувания удер- живались магнитом. Магнит следует укрепить в деревянном штативе полюсами вверх.

Очищенные от муки металлические частицы переносят в стакан вместимостью 100 см³ и зали- вают 25 см³ раствора гидроксида натрия 100 г/дм³ или калия и кипятят 30 мин на слабом огне; при этом происходит разрушение остатков частиц муки гидроксидом натрия. Содержимое стакана разбав- ляют тройным количеством воды и фильтруют через бумажный фильтр.

Фильтр промывают один-два раза водой и подсушивают в сушильном шкафу при 100 °С в течение 30 мин.

Металлические частицы собирают с фильтра магнитом через бумагу, переносят на тарирован- ное часовое стекло и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г.

8.4.4.          Обработка результатов

Содержание металлопримесей (Х###sub#<) в млн^-1 (мг/кг) рассчитывают по формуле

где т — масса исследуемого продукта, г; т_{ — масса часового стекла, г; т₂ — масса часового стекла с частицами железа, г; 10^б — коэффициент пересчета г в мг и в кг.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождения между которыми не должны превышать 0,03 млн^-1 (мг/кг).

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

Взвешенные металлические частицы просеивают через два металлических сита, верхнее — с диаметром отверстий 2 мм и нижнее — с отверстиями диаметром 0,5 мм. Металлические частицы, задержанные на том и другом сите, взвешивают отдельно и выражают их количество в миллиграм- мах на килограмм муки (или в граммах на тонну). Металлические частицы, задержанные на первом сите, считают крупнее 2 мм, на втором сите — крупнее 0,5 мм.

(метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции)

8.9.1.1.            Сущность метода

Метод основан на окислении органического вещества при сжигании его в серной кислоте в присутствии катализатора, отгонке образующегося аммиака паром, улавливании его раствором сер- ной кислоты и определении содержания азота методом титрования.

Белковые вещества определяют, умножая количества общего азота на коэффициент 6,25. Ме- тод применяют при разногласиях в оценке качества продукции.

8.9.1.2.            Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919—83 или газовые горелки.

Холодильник шариковый по ГОСТ 25336—82.

Воронка капельная по ГОСТ 25336—82.

Бюретка по ГОСТ 29251—91, вместимостью 50 см³.

Каплеуловитель по ГОСТ 25336—82.

Колбы для сжигания по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100 см³.

Колбы плоскодонные или круглодонные по ГОСТ 25336—82, вместимостью 500—700 см³.

Колбы плоскодонные по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250—300 см³.

Капельница по ГОСТ 25336—82.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

Кислота серная по ГОСТ 4204—77, концентрированная и раствор 0,05 моль/дм³ (0,1 н).

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, раствор 330 г/дм³ (33 %-ный) прокипяченный и раствор 0,1 моль/дм³ (0,1 н).

Медь сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165—78.

Калий сернокислый по ГОСТ 4145—74.

Метиловый красный спиртовой раствор 0,2 г/дм³ (0,02 %-ный).

Индикатор смешанный (Таширо).

8.9.1.4.            Проведение анализа

Навеску муки массой 0,2—0,3 г взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г (для рыбы 0,6—1,0 г, для тузлука до 5 г) в закрытую с одной стороны трубочку из фильтровальной бумаги или из станиоля, помещают в колбу для сжигания вместимостью 100 см³, добавляют несколько мелких кристаллов медного купороса (0,2—0,3 г) и приливают 10—20 см³ серной кислоты плот- ностью 1840 кг/м³.

Колбу с содержимым осторожно нагревают в вытяжном шкафу, не допуская разбрызгивания жидкости. Когда содержимое колбы станет однородным, прекращают нагревание, дают остыть, добавляют 0,5 г сернокислого калия и продолжают нагревание до тех пор, пока жидкость в колбе не станет прозрачной, зеленовато-голубой окраски без бурого оттенка. Внутренние стенки колбы долж- ны быть совершенно чистыми. Это достигается осторожным взбалтыванием содержимого колбы для смывания со стенок темных, обугленных частиц муки.

По окончании сжигания содержимое колбы охлаждают и количественно переносят в отгон- ную колбу вместимостью 500—750 см³ (черт. 8).

Колбу для сжигания тщательно ополаскивают, проверяя полноту смывания добавлением 1—2 капель раствора метилового красного.

Общий объем раствора в отгонной колбе должен быть не более 250—300 см³.

Приемником служит коническая колба вместимостью 250—300 см³, в которую из бюретки налито 25—30 см³ раствора серной кислоты 0,05 моль/дм³. Конец трубки холодильника должен быть погружен в раствор серной кислоты.

В отгонную колбу осторожно, по стенкам, избегая смешивания жидкостей, приливают 50—70 см³ раствора гидроксида натрия 330 г/дм³, бросают кусочек лакмусовой бумаги и быстро закрывают ее пробкой, соединенной посредством каплеуловителя с холодильником, осторожно пере- мешивают содержимое и нагревают. Реакция жидкости в колбе должна быть резко щелочной.

После закипания жидкости в колбе приемник опускают так, чтобы конец трубки холодильни- ка находился на некотором расстоянии от поверхности раствора и продолжают отгонку до тех пор, пока не отгонится не менее ²/₃ жидкости.

Конец отгонки определяют по лакмусовой бумаге. Если отгонка закончена, капля дистиллята не должна вызывать посинения красной лакмусовой бумаги. При появлении в конце отгонки при кипении толчков отгонку прекращают.

По окончании отгонки конец трубки холодильника обмывают водой в приемную колбу и содержащейся в ней избыток серной кислоты оттитровывают раствором гидроксида натрия 0,1 моль/дм³ в присутствии метилового красного или двойного индикатора.

Одновременно проводят контрольный анализ без навески исследуемого образца.

8.9.1.5.          Обработка результатов

Массовую долю белковых веществ (ЗГ ) в процентах вычисляют по формуле

(V - Vy) ■ К • 0,0014 • 6,25 • 100

где V — объем раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный на титрование серной кислоты в контрольном анализе, см³;

V_l — объем раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный на титрование избытка серной кислоты в рабочем анализе, см³;

К — коэффициент пересчета на точный раствор гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, г;

0,0014 — количество азота, эквивалентное 1 см³ раствора гидроксида натрия, 0,1 моль/дм³, г;

• — коэффициент пересчета количества азота на белковые вещества;

т — навеска муки, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,5 % для кормовой муки и 0,2 % для остальной продукции.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

методом с селеновой смесью — по п. 8.9.1, но в качестве катализатора используют 2 г селеновой смеси, состоящей из 1,9 весовых частей надсернокислого калия по ГОСТ 4146—74 и 0,1 части селенистокислой меди (0,1 часть селенистокислой меди можно заменить смесью из 0,05 частей сернокислой меди и 0,05 частей селена элементарного).

методом с перекисью водорода без отгонки

8.9.3.1.           Сущность метода

Метод основан на сжигании навески исследуемого образца в серной кислоте в присутствии перекиси водорода и определении общего азота кипячением минерализованной пробы с 20 см³ раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм³.

8.9.3.2.           Аппаратура, материалы и реактивы

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919—83 или горелки газовые.

Колбы мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 500 и 200 см³.

Бюретки по ГОСТ 29251—91, вместимостью 25 и 50 см³.

Капельницы по ГОСТ 25336—82.

Часы механические по ГОСТ 10733—98.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 и 50 см³.

Колбы конические по ГОСТ 25336—82, вместимостью 250 и 500 см³.

Колбы круглодонные длинногорлые (Кьельдаля) по ГОСТ 25336—82, вместимостью 100-250 см³.

Кислота серная по ГОСТ 4204—77, плотностью 1840 кг/м³ и раствор 0,05 моль/дм³ (0,1 н).

Водорода перекись по ГОСТ 10929—76, раствор 300 г/дм³ (30 %-ный).

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, раствор 150 г/дм³ (15 %-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

Смешанный индикатор: смешивают равные объемы спиртовых растворов метилового красно- го 2 г/дм³ (0,2 %-ного) и метиленового синего 1 г/дм³ (0,1 %-ного).

8.9.3.3.            Проведение анализа

Предварительно определяют количество гидроксида натрия в 20 см³ раствора 0,1 моль/дм³ после кипячения по отношению к серной кислоте 0,05 моль/дм³ и к добавляемым реактивам. Это количество условно называют «рабочим титром щелочи» и обозначают Т.

Установка «рабочего титра» 20 см³ 0,1 моль/дм³ раствора гидроокиси натрия и проверка реактивов

В коническую колбу вместимостью 500 см³ наливают 100 см³ дистиллированной воды, добавляют 1,5 см³ концентрированной серной кислоты и 5 капель смешанного индикатора.

Содержимое колбы осторожно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 150 г/дм³ до переход- ной окраски и подкисляют несколькими см³ раствора серной кислоты 0,05 моль/дм³; вновь точно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 0,1 моль/дм³.

В колбу приливают из бюретки 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, ставят на горящую плитку и кипятят 15 мин, считая с момента закипания, быстро охлаждают под краном или погружают в холодную воду.

Содержимое колбы нейтрализуют раствором серной кислоты 0,05 моль/дм³ и добавляют избыток ее 2—3 см³ для растворения карбонатов. Отмечают объем добавленного раствора серной кислоты.

Добавляют 2—3 капли смешанного индикатора и проводят обратное титрование раствором гидро- ксида натрия 0,1 моль/дм³ до появления такой же окраски, какая была перед кипячением. «Рабочий титр» (7) 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³ по отношению к раствору серной кислоты 0,05 моль/дм³ вычисляют по формуле

т = ц • к, - v₂ • к₂,

где Pj — объем раствора серной кислоты 0,05 моль/дм³, прилитый в колбу после кипячения, см³;

К_{ — поправочный коэффициент на точный раствор 0,05 моль/дм³ серной кислоты;

V₂ — объем раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный на обратное титрова- ние, см³;

К₂ — поправочный коэффициент на точный раствор 0,1 моль/дм³ гидроксида натрия.

Пример.

Перед кипячением в колбу прилито 20 см³ раствора гидроксида натрия (К= 1). После кипячения добавлено 22 см³ раствора серной кислоты К= 1. На обратное титрование пошло 2,5 см³ раствора гидроксида натрия (К= I).

Г = 22-1 - 2,5-1 = 19,5.

Это свидетельствует о том, что при кипячении произошло снижение «рабочего титра» раство- ра гидроксида натрия вследствие возможного присутствия солей аммония в реактивах или под влияни- ем других факторов.

Исходя из установленного «рабочего титра» раствора щелочи, можно в дальнейшем опреде- лять количество азота по снижению «рабочего титра» щелочи, так как каждый см³ раствора ее эквивалентен 1,4 мг азота. При последующих определениях необходимо пользоваться одними и теми же реактивами.Необходимо ежемесячно и при смене титрованных растворов проверять «рабо- чий титр» раствора щелочи.

0,8—1,4 г рыбной муки (для рыбы и продуктов с высоким содержанием воды навеска 1,8—2,0 г), отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г, помещают в колбу для сжигания вместимостью 100—250 см³, добавляют соответственно 20 или 10—12 см³ серной кислоты плотностью 1840 кг/м³ и 5 см³ перекиси водорода. Происходит саморазогревание смеси и выделение газов.

По окончании выделения газов колбу нагревают в колбонагревателе до закипания серной кислоты, немного охлаждают, осторожно, по стенке колбы, добавляют 2—3 см³ перекиси водорода и продолжают нагревание. Добавление перекиси водорода с последующим нагреванием проводят несколько раз, постепенно уменьшая ее количество. Процесс минерализации продолжается 35—45 мин.

По окончании минерализации (жидкость в колбе должна быть полностью обесцвечена) и ох- лаждения колбы содержимое ее количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 см³ при исследовании рыбной муки и 200 см³ при исследовании рыбы и рыбных продуктов с высоким содержанием воды. Объем жидкости в колбе доводят до метки дистиллированной водой и тщатель- но перемешивают содержимое.

Пипеткой отбирают 50 см³ приготовленного раствора, переносят в коническую колбу вмести- мостью 500 см³, добавляют 50 см³ дистиллированной воды, 5 капель смешанного индикатора.

Содержимое колбы осторожно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 150 г/дм³ до переход- ной окраски, подкисляют несколькими см³ раствора серной кислоты 0,05 моль/дм³, а затем вновь точно нейтрализуют раствором гидроксида натрия 0,1 моль/дм³.

После этого в колбу приливают из бюретки 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³ и ставят на горячую плитку. Содержимое колбы интенсивно кипятят точно 15 мин, считая с момента закипания, быстро охлаждают (под краном или погружают в холодную воду), нейтрализуют раство- ром серной кислоты 0,05 моль/дм³ и добавляют избыток ее 2—3 см³ для растворения карбонатов, отмечая количество добавленного раствора серной кислоты.

Добавляют 2—3 капли смешанного индикатора и проводят обратное титрование раствором гидроксида натрия 0,1 моль/дм³ до появления такой же окраски, какая была перед кипячением.

8.9.3.4.         Обработка результатов

Массовую долю белковых веществ (Х₃₈) в процентах вычисляют по формуле

(Т + V₂ ■ К₂ - V_x ■ К_х) • 0,0014 • 6,25 • 100 • V

где Т — «рабочий титр» 20 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³ (0,1 и);

• — объем раствора серной кислоты 0,05 моль/дм³, прилитый для нейтрализации и подкисле-

ния жидкости после ее кипячения, см³;

V₂ — объем раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, израсходованный на обратное титрова- ние избытка серной кислоты, см³;

V₃ — объем раствора, взятый для кипячения, см³;

К_{ — коэффициент пересчета на точный 0,05 моль/дм³ раствор серной кислоты;

К₂ — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм³ гидроксида натрия;

0,0014 — количество азота, эквивалентное 1 см³ раствора гидроксида натрия 0,1 моль/дм³, г;

6,25  — коэффициент пересчета азота на белковые вещества; m — навеска муки, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,5%.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

Колба мерная по ГОСТ 1770—74, вместимостью 100 см³.

Кислота серная по ГОСТ 4204—77, раствор 0,01 моль/дм³ (0,02 и).

Натрия гидроксид по ГОСТ 4328—77, раствор 0,02 моль/дм³ (0,02 и).

8.9.4.2.          Проведение анализа

0,2—0,3 г муки (при исследовании рыбы и продуктов рыбного промысла с повышенным со- держанием воды навеску увеличивают до 3 г, тузлука — до 5 г) взвешивают с абсолютной погреш- ностью не более 0,0005 г в закрытую с одной стороны трубочку из фильтровальной бумаги или станиоля, помещают в колбу для сжигания вместимостью 100 см³, добавляют несколько мелких кристаллов сернокислой меди и приливают 10—20 см³ серной кислоты плотностью 1840 кг/м³.

Колбу с содержимым осторожно нагревают в вытяжном шкафу, не допуская разбрызгивания жидкости. Когда содержимое колбы станет однородным, прекращают нагревание, дают остыть, прибавляют 0,5 г сернокислого калия и продолжают нагревание до тех пор, пока жидкость в колбе не станет прозрачной зеленовато-голубой без бурого оттенка. Внутренние стенки колбы должны быть совершенно чистыми. Это достигается осторожным взбалтыванием содержимого колбы для смывания со стенок темных, обугленных частиц муки.

По окончании сжигания содержимое колбы охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³. Из полученного раствора отбирают пипеткой 10 см³ жидкости и через воронку вносят в колбу прибора для отгонки аммиака, смывая остаток с воронки дистиллированной водой.

Отгонку аммиака водяным паром ведут в приборе, приведенном на черт 8.

В коническую колбу-приемник 6 наливают из бюретки 25 — 30 см³ 0,01 моль/дм³ раствора серной кислоты и опускают в нее конец холодильника 5. Закрывают нижнее отверстие предохрани- тельного сосуда 2. Через воронку 3 наливают в колбу-смеситель 4 5—6 см³ раствора гидроокиси натрия 330 г/дм³; воронку 3 заменяют стеклянной палочкой или применяют зажим Мора и затем пускают пар.

Отгонку с водяным паром продолжают до тех пор, пока в приемную колбу не отгонится 50—60 см³ жидкости. По окончании отгонки конец холодильника обмывают дистиллированной водой, собирают воду в приемник и титруют избыток кислоты раствором 0,02 моль/дм³ гидроксида натрия в присутствии двойного индикатора.

Черт. 8

8.9.4.3.            Обработка результатов

Массовую долю белковых веществ (ЗГ ) в процентах вычисляют по формуле

^          _ (Г- V_x) ■ К ■ 0,00028 • 6,25 • 100 • V₂

^Х[8]> “                                               У^П                                              ’

где        V — объем раствора гидроксида натрия 0,02 моль/дм³, израсходованный на титрование сер-

ной кислоты в контрольном анализе, см³;

Fj — объем раствора гидроксида натрия 0,02 моль/дм³, израсходованный на титрование из- бытка серной кислоты в рабочем анализе, см³;

0,00028 — количество азота, эквивалентное 1 см³ 0,02 моль/дм³ раствора гидроксида натрия, г;

К — коэффициент пересчета на точный раствор 0,02 моль/дм³ гидроксида натрия;

• — коэффициент пересчета азота на белковые вещества;

V₂ — объем, в котором растворена сожженная навеска, см³;

V₃ — объем раствора, взятый для отгонки, см³; т — навеска исследуемого образца, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать для кормовой муки 0,5 %, для остальной продукции 0,2 %.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.10.1.1.             Сущность метода

Метод основан на способности ионола давать розовое окрашивание с хлорным железом и а, а-дипиридилом.

Метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции.

8.10.1.2.             Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3.

Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336—82.

Парообразователь.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919—83.

Весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г по ГОСТ 24104—88.

Колбы мерные по ГОСТ 1770—74, вместимостью 25, 100, 200 см³.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336—82.

Пипетки градуированные по ГОСТ 29227—91.

Часы механические по ГОСТ 10733—98.

Колбы конические со шлифом по ГОСТ 25336—82, вместимостью 25 и 50 см³.

Трубки соединительные стеклянные по ГОСТ 25336—82.

Компаратор.

Кальций хлористый кристаллический.

Железо треххлористое 6-водное по ГОСТ 4147—74, свежеприготовленный раствор 2 г/дм³ (0,2 %-ный).

а, а -дипиридил (4-метил-2,6-дитретичного бутилфенола).

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962—67, растворы 960 г/дм³ (96 %-ный) и 500 г/дм³ (50 %-ный).

Ионол технический перекристаллизованный из этилового спирта 960 г/дм³ (96 %-ного).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709—72.

8.10.1.3.             Подготовка к анализу

200 мг а, а -дипиридила растворяют в 1 см³ этилового спирта 960 г/дм³ и доводят объем дис- тиллированной водой до метки в мерной колбе вместимостью 100 см³.

0,04 г перекристаллизованного ионола растворяют в этиловом спирте 960 г/дм³ в мерной колбе вместимостью 200 см³, доводят объем до метки спиртом и перемешивают. Раствор содержит 0,2 мг ионола в 1 см³.

Основной стандартный раствор ионола годен к употреблению в течение месяца при хранении его в холодном темном месте.

Раствор готовят непосредственно перед определением.

2,5 см³ основного стандартного раствора ионола разбавляют этиловым спиртом 500 г/дм³ в мерной колбе вместимостью 25 см³. Раствор содержит 0,02 мг ионола в 1 см³.

8.10.1.4.          Проведение анализа

В колбу для отгонки, соединенную с холодильником, помещают 3 г кристаллического хлори- стого кальция и 40 см³ дистиллированной воды. Содержимое колбы охлаждают до комнатной тем- пературы. Отвешивают 2 г исследуемой рыбной муки с абсолютной погрешностью не более 0,001 г и помещают в ту же колбу. Колбу закрывают пробкой, в которую вставлены две стеклянные трубки, одна — для ввода в колбу пара из парообразователя, другая— для отвода дистиллята через холодиль- ник в приемную колбу и нагревают, отгоняя ионол паром.

Дистиллят собирают в мерную колбу вместимостью 200 см³. Интенсивность отгонки должна быть такой, чтобы 100 см³ дистиллята были отогнаны за 20—30 мин. Когда в приемнике соберется 100 см³ дистиллята, отгонку прекращают. Форштос холодильника смывают небольшими порциями подогретого до 70 °С этилового спирта 960 г/дм³, сливая его в мерную колбу с дистиллятом. Содер- жимое колбы охлаждают, доводят объем до метки этиловым спиртом, закрывают пробкой и переме- шивают.

Для проведения цветной реакции в одну коническую колбу с притертой пробкой вмести- мостью 25—50 см³ вносят пипеткой 4 см³ дистиллята и 4 см³ спирта 500 г/дм³, в другую — 8 см³ этилового спирта 500 г/дм³ (контрольный опыт). В каждую колбу приливают по 2 см³ раствора а, а- дипиридила, перемешивают, добавляют по 2 см³ раствора хлорного железа, снова перемешивают и ставят на 30 мин в темное место.

По истечении указанного времени измеряют оптическую плотность окрашенных растворов фотоэлектроколориметром в кювете с рабочей длиной 10 мм при длине волны 530 нм. Содержание ионола, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

8.10.1.5.          Построение градуировочного графика

В 8 конических колб с притертыми пробками вместимостью 25—50 см³ вносят от 0 до 2,5 см³ стандартного рабочего раствора, содержащего 0,02 мг ионола в 1 см³ (см. табл. 7) и доводят объем в каждой колбе до 8 см³ спиртом 500 г/дм³.